성대 점액 층 : 쥐의 시각화를 위한 조직학적 프로토콜 비교

 
성대의 조직학적 구조을 아는 것은
질병을 이해하는데 아주 중요합니다.

지금까지 성대조직에서
가장 위쪽에 있는 상피층이 중층편평상피세포층으로 이루어져있다고
알고 있었는데
이 논문에서 상피층 위에 점액층에 대한 내용에 대해 알려줍니다.



성대 점액 층 : 쥐의 시각화를 위한 조직학적 프로토콜 비교 
Vocal fold mucus layer : Comparison of histological protocols for visualization in mice
Laryngoscope Investig Otolaryngol. 2022 Apr; 7(2): 444–453.
Ran An, PhD, Daniel Robbins, MD, Federico E. Rey, PhD, and Susan L. Thibeault, PhD, CCC‐SLP
 
초록
목적:
성대점막의 점액층과 관련된 상피는 정상 음질을 촉진할 뿐만 아니라 조직의 보호와 윤활 작용에 필수적인 역할을 한다.
숙주 면역 조절에 관여하는 후두 미생물군의 서식지 역할을 하고, 성대 점액은 후두의 건강과 질병에 기여한다.
그러나, 그것은 불안정한 구조로 인해 조사하는 것이 어렵다. 
우리는 성대 점액층의 자연스러운 모습을 복구하기 위한 연구로 재현가능한 조직학적 프로토콜을 확립하는 것을 목표로 한다.
방법:
쥐 모델을 사용하였고, 우리는 다양한 고정 방법의 적합성을 비교하였다. 메타칸methacarn, 포르말린 formalin, 포르말린으로 고정후 냉동보존, 파라포름알데히드 paraformaldehyde(PFA), 아세톤 acetone 그리고 두 염색 방법(알시안 블루 Alcian Blue(pH 2.5)/ 과요오드산 쉬프 periodic acid Schiff(AB/PAS))을 비교하였다.
고정과 염색의 결과는 조직 형태의 보존과 점액층의 온전함을 기초로 평가하였다.
뮤신 단백질Mucin protein인 Muc1, Muc4는 성대 점막을 덮고 있는 점액층의 존재를 입증하기 위해 염색하였다.
결과:
Methacarn 고정 후 PAS 염색은 부드럽고 연속적인 점액층을 보존하고 표시할 수 있어 점액 두께와 점액 염색을 확인할 수 있다.
결론: 
우리의 연구는 성대 표면 수분, 이온/영양소 수송, 정상적인 음성 품질뿐만 아니라 성대 병태생리학 및 후두의 숙주 ‐ 미생물 상호작용을 포함한 성대 점액 생물학 연구를 용이하게 하도록 성대 점액층의 시각화를 위한 조직학적 프로토콜을 처음으로 확립하였다.
 

성대 점액층 도식화와 점막 표면 분포

 
 
 
성대 점막은 상피층epithelium과 고유층lamina propria로 구성되어 있고 얇은 점액 층으로 덮혀 있어 정상음질을 촉진하고 성대의 최적의 생체역학적 특징을 지지한다. 점액은 염분, 단백질, 지질 외에 95% 이상이 물로 이루어진 이질적인 혼합물이다. 높은 수분 함량에도 불구하고 점액은 다양한 뮤신( O- 글리코실화 수가 많은 친수성 단백질 복합체)의 존재로 인해 고체의 많은 물리적 특성을 보유한다. 점액층은 흡기 시 공기 중의 병원균pathogen, 입자particle, 독성 화학물질toxic chemical과 위식도 역류 등 외부 자극에 노출되지 않도록 기저 조직을 보호하는 점탄성 물리적 장벽을 형성한다. 
공생 미생물군의 자연서식지 역할을 하며, 더 빠른 상피세포의 회전율, 점액층의 두께가 증가하고 높은 점액밀도 같이 병원군 침입에 대해 강화된 구조적 보호 기능을 촉진한다.
음성장애를 가진 환자에서 점액 생성 뿐만아니라 점탄성viscosity가 증가되는 것을 공통적으로 관찰할 수 있는데 이런 유사한 점액 구조 강화가 숙주 방어 조절을 하거나 성대진동에 영향을 미칠 수 있다는 것을 제안할 수 있다.
따라서 건강과 병원성 미생물군과 관련된 성대 점액층 장벽 방어를 검사하는 것은 최적의 치료 패러다임을 보장하고 후두 병리학 메커니즘을 완전히 조사하기 위해 필수적이다.
하지만 성대점액의 불안정한 구조는 조직학적 특성화와 정량적인 특성을 방법론적인 관점에서 측정하기 어렵다.